Comparação dos níveis séricos da Cocaine and Amphetamine Regulated Transcript (CART) entre sangue de cordão umbilical e sangue periférico em gestantes usuárias de crack / Comparison between serum levels of Cocaine and Amphetamine Regulated Transcript (CART) between umbilical cord blood and peripheral blood of pregnant crack users

INTRODUÇÃO: No Brasil, o uso de crack permanece um desafio à saúde pública devido à facilidade de aquisição da droga e sua elevada capacidade de induzir dependência. A exposição intrauterina (EIU) à cocaína está associada a alterações neurocomportamentais durante a infância e adolescência. Em estudo prévio do nosso grupo, achou-se menor nível de estresse oxidativo (EO) em recém-nascidos (RN) com EIU. Uma possível explicação pode ser a Cocaine and Amphetamine Regulated Transcript (CART), um antioxidante endógeno presente desde o período embrionário e ativado por maiores níveis de dopamina. OBJETIVO: Verificar a correlação entre os níveis de CART no sangue de cordão umbilical (SCU) e sangue periférico de 57 gestantes com exposição ao crack. MÉTODOS: Trata-se de um estudo transversal, com amostragem consecutiva, em que o desfecho primário foi a correlação entre os níveis de CART no SCU e sangue periférico materno no pós-parto imediato. Dados gestacionais e perinatais foram sistematicamente coletados. RESULTADOS: Houve correlação significativa entre os níveis de CART no sangue de cordão umbilical e sangue periférico materno (rs= 0,350 e p<0,05). CONCLUSÕES: Estes achados demonstram que os níveis de CART no sangue materno e no SCU se correlacionam. Todavia, não se pode afirmar de quem é a produção, ou se é produzida por ambos. O presente trabalho pode ajudar a elucidar os caminhos neurobiológicos responsáveis pelas alterações de neurodesenvolvimento, contribuindo para a ampliação das possibilidades de intervenções precoces.

INTRODUCTION: The use of crack cocaine remains a public health challenge in Brazil, due to easy drug acquisition and its high ability to induce dependence. Intrauterine exposure (IUE) to crack cocaine is associated with neurobehavioral changes during childhood and adolescence. In a previous study of our group, lower levels of oxidative stress (OS) were found in newborns with IUE. One possible explanation may be the Cocaine and Amphetamine Regulator Transcript (CART), an endogenous antioxidant present since the embryonic period activated by higher levels of dopamine. OBJECTIVE: The aim of this study is to investigate the correlation of CART levels between umbilical cord blood (UCB) and peripheral blood samples of 57 pregnant women exposed to crack. METHODS: This is a cross-sectional study with a consecutive sampling, in which the primary outcome was the correlation between CART levels in UCB and peripheral blood of their mothers in immediate postpartum. Gestational and perinatal data were systematically collected. Spearman correlation test was performed after checking the pattern of distribution, being considered a 0.05 significance level. RESULTS: There was a significant correlation between CART levels in umbilical cord blood and peripheral blood (rs = 0.350 and p <0.05). CONCLUSIONS: These findings suggest a correlation between CART levels at UCB and mother's blood. However, it remains unclear whether it is produced by the mother, the fetus, or both. This study may help to elucidate the neurobiological pathways responsible for neurodevelopmental changes, providing a rationale for early interventions.

Avaliação da trealose como crioprotetor de células-tronco hematopoiéticas de sangue de cordão umbilical e placentário / Evaluation of trehalose as a cryoprotectant natural of hematopoietic stem cells from umbilical cord blood and placental

O sangue do cordão umbilical e placentário (SCUP) tem sido usado como fonte de células-tronco hematopoiéticas (CTH) para reconstituir a função medular (hematopoiese). A maioria das vezes, esta modalidade de transplante requer a criopreservação das CTH, que permanecem congeladas até uma possível utilização futura. Na criopreservação de CTH, o reagente químico dimetilsulfóxido (DMSO) tem sido utilizado como um crioprotetor. No entanto, tem sido provado que DMSO tem efeitos tóxicos para o corpo humano. Muitos organismos na natureza possuem uma capacidade de sobreviver ao congelamento e à desidratação acumulando dissacarídeos, como a trealose e sacarose, por isso a trealose, tem sido investigada como um crioprotetor alternativo para diversos tipos celulares. Outro dano muito comum durante o congelamento é a formação de espécie reativas de oxigênio (ERO) que diminui a viabilidade celular, por isso a adição de bioantioxidantes na solução de criopreservação das células é passo muito importante. Este estudo foi dividido em duas fases na primeira foram avaliados os resultados obtidos com a adição de antioxidantes na solução de criopreservação das células de SCUP e na segunda fase avaliou-se a hipótese que a solução de criopreservação contendo trealose intracelular e extracelular melhora a recuperação e a viabilidade das células-tronco do SCUP, após a criopreservação. SCUP foi processado e submetido à criopreservação em soluções contendo na primeira fase: soluções com diferentes concentrações de DMSO (10%, 5% e 2,5%), assim como as combinações de DMSO (5%, 2,5%) com um dos dissacarídeos (60mmol/L) e ácido ascórbico e/ou catalase (10mg/mL); e na segunda fase: soluções contendo diferentes concentrações de DMSO (10% e 2,5%), assim como as combinações de DMSO (2,5%) com trealose intra (a trealose foi introduzida na célula por meio de lipossomas) e extracelular e soluções contendo trealose intra e extracelular sem DMSO, armazenados por duas semanas em N2L, e descongeladas...

The umbilical cord blood (UCB) has been used as a source of primitive hematopoietic stem cells (HSC) to reconstitute the hematopoiesis. Most often, it is required the cryopreservation of HSC, which remain frozen in banks for possible future use. For cryopreservation of HSC, the chemical reagent dimethylsulfoxide (DMSO) has been used as a cryoprotectant. Many organisms in nature have a capacity of survive freezing and dehydration by accumulating disaccharides, so the trehalose, has been actively investigated as an alternative cryoprotector, other damage which is very common during freezing is oxygen free radicals formation which decreases the cellular viability after thawing, so the addition of bioantioxidants in the solution of cryopreservation of cells is very important. This study was divided into two phases: first, we evaluated the results obtained with the addition of antioxidants in the solution for cryopreservation of cord blood cells and the second phase: evaluate the hypothesis that the cryopreservation solution containing intracellular and extracellular trehalose improves recovery and viability of cord blood stem cells after cryopreservation. UBC was processed and subjected to cryopreservation solutions containing for the first phase: solutions with different concentrations of DMSO (10%, 5% and 2.5%), as well as combinations of DMSO (5%, 2.5 %) with a disaccharide (60 mmol/L), ascorbic acid and/or catalase (10mg/mL), and for the second phase: solutions containing different concentrations of DMSO (10% and 2.5%), as well as combinations of DMSO (2.5%) with intracellular trehalose (trehalose was introduced into the cell by means of liposomes) and solutions containing extra and intracellular trehalose without DMSO, stored for two weeks in N2L, and thawed. The thawed cells were assessed by flow cytometry, MTT and colony forming units (CFU) assays. In the first phase of the study our analysis showed catalase improved the preservation CD34+ and CD123+...

Concentração de micronutrientes em mães e seus recém-nascidos por ocasião do parto / Mother's and newborn's plasmatic concentration of micronutrients at the moment of childbirth

Trata-se de estudo transversal com uma amostra sequencial de conveniência de 73 gestantes, não fumantes, sem intercorrências durante a gravidez e seus recém-nascidos normais, objetivando comparar concentrações plasmáticas de retinol, β caroteno, licopeno, α tocoferol e cobre entre mães e recém-nascidos. Colheu-se sangue da parturiente e do cordão umbilical (após dequitação) para dosagem dos micronutrientes. Retinol, β caroteno, licopeno e α tocoferol foram dosados por HPLC e o cobre por espectrofotometria de absorção atômica. Para análise foram separados 2 grupos:- grupo 1, 38 gestantes com suplementação vitaminico-mineral pelo menos no último trimestre da gravidez e grupo 2, 35 gestantes que não haviam recebido suplementação. As comparações estatísticas foram pelo teste t de Student ou pelo teste de Wilcoxon, com um α crítico de 0,05. Os dois grupos de mães eram símiles quanto a idade, paridade, IMC e a baixa ingestão de calorias e de micronutrientes. Os grupos de recém-nascidos não evidenciaram diferença quanto a sexo, peso, comprimento e perímetro cefálico. As concentrações plasmáticas maternas do grupo 1 foram maiores para o retinol(p = 0,0034) e a tocoferol(p = 0,0279). β caroteno, licopeno e cobre não evidenciaram diferenças entre os dois grupos de mães. Nos dois grupos de recém-nascidos as concentrações de retinol, tocoferol e cobre foram semelhantes e praticamente não houve concentrações detectáveis de licopeno e α caroteno. Em ambos os grupos retinol, a tocoferol e cobre apresentaram maiores concentrações nas mães do que nos recém-nascidos, p = 0,0003, p = 0,0001, p = 0,0001, respectivamente. Conclui-se que as concentrações nos recém-nascidos foram sempre menores do que as maternas, independentemente da ingestão e da suplementação durante a gravidez.(AU)

Cross sectional study of a sequential convenience sample of 73 non smokers' pregnant women with uncomplicated pregnancies and their normal newborns. The aim of the study was to compare plasmatic concentrations of retinol, β-carotene, licopen and α-tocopherol between mothers and their infants. Blood was obtained from parturient and umbilical cord for micronutrient analysis. HPLC was used for retinol, α-carotene, licopen and α-tocopherol analysis. Atomic absorption spectrophotometry was used for copper measurements. The sample was divided into 2 groups: group 1, with 38 women that had received vitamin and mineral supplementation during the last gestational trimester and group 2, with 35 women who have had no supplementation. Statistic comparison used Student t test or Wilcoxon test (alpha = 0.05). The groups of mothers were similar regarding age, parity, BMI and ingestion (low) of calories and micronutrients. The newborn groups had no differences according to sex, head circumference, weight and length. Plasmatic concentrations in group 1 of mothers were greater for retinol (p = 0.0034) and α-tocopherol (p = 0.0279). β-carotene, licopen and cupper showed no differences between the groups at mothers. In both newborn groups concentration of retinol, α-tocopherol and copper were quite similar and there was no clearly detectable licopen and ² carotene. In both, retinol, α-tocopherol and cupper showed larger concentration in mothers than in newborns (respectively p = 0.0003 and p = 0.0001). The conclusion is that newborn concentrations were systematically smaller than their mothers', independently of ingestion or supple-mentation during pregnancy.(AU)

Concentração de micronutrientes em mães e seus recém-nascidos por ocasião do parto / Mothers' and newborns' plasmatic concentration of micronutrients at the moment of childbirth

Trata-se de estudo transversal com uma amostra sequencial de conveniência de 73 gestantes, não fumantes, sem intercorrências durante a gravidez e seus recém-nascidos normais, objetivando comparar concentrações plasmáticas de retinol, β caroteno, licopeno, α tocoferol e cobre entre mães e recém-nascidos. Colheu-se sangue da parturiente e do cordão umbilical (após dequitação) para dosagem dos micronutrientes. Retinol, β caroteno, licopeno e α tocoferol foram dosados por HPLC e o cobre por espectrofotometria de absorção atômica. Para análise foram separados 2 grupos:- grupo 1, 38 gestantes com suplementação vitaminico-mineral pelo menos no último trimestre da gravidez e grupo 2, 35 gestantes que não haviam recebido suplementação. As comparações estatísticas foram pelo teste t de Student ou pelo teste de Wilcoxon, com um α crítico de 0,05. Os dois grupos de mães eram símiles quanto a idade, paridade, IMC e a baixa ingestão de calorias e de micronutrientes. Os grupos de recém-nascidos não evidenciaram diferença quanto a sexo, peso, comprimento e perímetro cefálico. As concentrações plasmáticas maternas do grupo 1 foram maiores para o retinol(p = 0,0034) e a tocoferol(p = 0,0279). β caroteno, licopeno e cobre não evidenciaram diferenças entre os dois grupos de mães. Nos dois grupos de recém-nascidos as concentrações de retinol, tocoferol e cobre foram semelhantes e praticamente não houve concentrações detectáveis de licopeno e α caroteno. Em ambos os grupos retinol, a tocoferol e cobre apresentaram maiores concentrações nas mães do que nos recém-nascidos, p = 0,0003, p = 0,0001, p = 0,0001, respectivamente. Conclui-se que as concentrações nos recém-nascidos foram sempre menores do que as maternas, independentemente da ingestão e da suplementação durante a gravidez

Transplante de sangue de cordão umbilical - SCU / Umbilical cord blood transplantation

A frequente utilização de sangue de cordão umbilical - SCU como fonte de células- tronco hematopoéticas - CTH, tanto em crianças, como em adultos, que não dispõem de doador na família, tem levado ao estabelecimento da padronização de critérios em sua seleção, objetivando a obtenção de melhores resultados. A escolha da unidade de SCU deve basear-se no número total de células nucleadas e no número de diferenças de antígenos leucocitários humanos (HLA). Diante de uma unidade com celularidade mínima, deve-se considerar a possibilidade da utilização de duplo cordão. Frente a mais de uma unidade com características semelhantes, a realização da contagem de células CD34 e da compatibilidade ABO, assim como a qualidade e a rapidez para obtenção da unidade, podem definir a escolha.

The frequent use of umbilical cord blood as the source of hematopoietic stem cells, both in children and adults who do not have related donors, has led to the establishment of a better standardization of selection criteria aiming at improving the results. The choice of the umbilical cord blood unit should be based on the total number of nucleated cells and the number of differences in the human leukocyte antigen (HLA) system. When a unit has minimal cellularity, the use of a double cord blood transplant should be considered. When two or more units have similar characteristics, the choice may be determined by the CD34 count, ABO compatibility and the quality and speed to obtain the unit.

Sangue de cordão umbilical para uso autólogo ou grupo de pacientes especiais: [revisão] / The potential therapeutic use of cord blood in autologous transplants or in special patients: a review and update

O sangue de cordão umbilical e placentário (SCUP) é uma rica fonte de células-tronco (CT) hematopoéticas e é amplamente utilizado como substituto da medula óssea em casos de transplante. As células do SCUP possuem vantagens sobre as células da medula óssea (MO), principalmente por serem mais jovens e apresentarem maior taxa proliferativa. Além dos progenitores hematopoéticos, o sangue de cordão umbilical contém progenitores endoteliais e mesenquimais, sugerindo sua possível aplicação nos novos protocolos de terapia celular para diferentes tecidos. Na presente revisão, discutimos a importância do armazenamento do sangue de cordão umbilical autólogo e as pesquisas desenvolvidas para a sua aplicação em doenças degenerativas.

Umbilical Cord Blood is a rich source of hematopoietic stem cells widely used as a substitute of bone marrow (BM) in transplants. Cells from umbilical cord blood present advantages over BM cells, mainly as they are younger and a have higher proliferative rate. Besides hematopoietic stem cells, umbilical cord blood contains endothelial and mesenchymal progenitor cells, suggesting their possible application in cell therapy protocols for different tissues. In this paper, we discuss the importance of autologous umbilical cord blood storage and the research on stem cell transplantation for degenerative diseases.

Hemopoietic progenitor cell identification in fetal and adult blood / Célula progenitora hamatopoética: identificação em sangue fetal e de adulto

Hemopoietic progenitor cells give rise to all cellular elements of the blood and are of importance as a potential source of cells used for correction of various pathological conditions. The main objective of this study was to identify and quantitative hemopoietic progenitor cell in antenatal fetal blood, in cord blood at the time of delivery and in adult blood, using monoclonal antibodies to surface markers and flow cytometry. CD34+ cells, most of them probably representing progenitor cells, were detected in prenatal fetal blood as early as the 17th week of gestation. The proportion of these cells showed a tendency to decrease as the pregnancy progressed. Within the population of CD34+ cells, a relatively low proportion (less than 1 percent) were negative for the surface marker CD33 or HLA-Dr, indicating a population of primitive stem cells, i.e., progenitor cells no committed to a specific lineage. On the contrary, another group coexpressed CD33 or HLA-Dr, being more mature progenitor cells already committed to differentiate along a specific lineage. The percentage of CD34+ obtained in blood of adult patients after mobilization with chemotherapeutic agents and growth factors showed an average value of 2.7± 3.1 percent. The percentage of CD34+ in the apheresis products of various patients varied from 0.58 to 1.48. In some cases the cells were reinfused in the patient with good results. Our findings are in agreement with previous studies suggesting that CD34+ stem cells is a heterogeneous population, with each subset having variable degree o commitment to differentiate toward a specific cell lineage.

As células progenitoras hematopoéticas são as responsáveis pela produção de todos os elementos do sangue e são as potenciais fontes de células usadas para o tratamento de várias condições patológicas. O principal objetivo deste trabalho foi identificar e quantificar as células progenitoras hematopoiéticas no sangue fetal do período pré-natal, no sangue de cordão umbilical no momento do parto e no sangue do adulto, usando anticorpos monoclonais para marcadores de superfície e citometria de fluxo. As células CD34+ na maioria das vezes representam células progenitoras e foram detectadas no sangue fetal pré-natal tão precoce como na 17ª semana de gestação. A proporção destas células mostrou a tendência de diminuir durante a progressão da gestação. Dentro da população de células CD34+, uma proporção relativamente pequena (menos de 1 por cento) foi negativa para os marcadores de superfície CD33 ou HLA-Dr, indicando uma população de células primitivas, isto é, células progenitoras não comissionadas com uma linhagem específica. Ao contrário, outro grupo co-expressa CD33 ou HLA-Dr, sendo progenitores celulares mais maduros já comprometidos com linhagens específicas. A porcentagem de CD34+ obtida no sangue de adultos após mobilização com agentes quimioterápicos e fator de crescimento mostrou uma média de 2.7+/-3.1 por cento. 0 por cento de CD34+ no produto aferético de vários pacientes variou de 0.58 a 1.48. Em alguns casos as células foram infundidas nos pacientes com bons resultados. Nossos achados estão de acordo com estudos prévios sugerindo que células CD34+ sejam uma população heterogênea com cada subgrupo apresentando graus de comprometimento com diferentes linhagens específicas.

Cultivo de células mesenquimais do sangue de cordão umbilical com e sem uso do gradiente de densidade Ficoll-Paque / Blood mesenchymal stem cell culture from the umbilical cord with and without Ficoll-Paque density gradient method

OBJETIVOS: Implantação de técnicas de isolamento e cultivo de células-tronco mesenquimais do sangue de cordão umbilical humano, com e sem uso de gradiente de densidade Ficoll-Paque (d=1,077g/ml). MÉTODOS: Dez amostras de sangue de cordão umbilical humano de gestação a termo foram submetidas a dois procedimentos de cultivo de células-tronco mesenquimais: sem gradiente de densidade Ficoll-Paque e com gradiente de densidade. As células foram semeadas em frascos de 25cm² a uma densidade de 1x10(7)células nucleadas/cm² (sem Ficoll) e 1,0x10(6) células mononucleares/cm² (com Ficoll). As células aderentes foram submetidas a marcação citoquímica com fosfatase ácida e reativo de Schiff. RESULTADOS: No procedimento sem gradiente de densidade Ficoll, foram obtidas 2,0-13,0x10(7) células nucleadas (mediana=2,35x10(7)) e, no procedimento com gradiente de densidade Ficoll, foram obtidas 3,7-15,7x10(6) células mononucleares (mediana=7,2x10(6)). Em todas as culturas foram observadas células aderentes 24 horas após o início de cultivo. As células apresentaram morfologias fibroblastóides ou epitelióides. Na maioria das culturas houve proliferação celular nas primeiras semanas de cultivo, mas após a segunda semana, somente três culturas provenientes do método sem gradiente de densidade Ficoll-Paque mantiveram crescimento celular, formando focos confluentes de células. Essas culturas foram submetidas a várias etapas de tripsinização para espalhamento ou subdivisão e permaneceram em cultivo por períodos que variaram de dois a três meses. CONCLUSÃO: Nas amostras estudadas, o isolamento e cultivo de células-tronco mesenquimais do sangue de cordão umbilical humano pelo método sem gradiente de densidade Ficoll-Paque foi mais eficiente do que o método com gradiente de densidade Ficoll-Paque.

OBJECTIVES: Implantation of cell separation and mesenchymal stem cell culture techniques from human umbilical cord blood with and without using the Ficoll-Paque gradient density method (d=1.077g/ml). METHODS: Ten samples of the umbilical cord blood obtained from full-term deliveries were submitted to two different procedures of mesenchymal stem cell culture: a) Method without the Ficoll-Paque density gradient, which concentrates all nucleated cells; b) Method with the Ficoll-Paque density gradient, which selects only low-density mononuclear cells. Cells were initially plated into 25 cm² cultures flasks at a density of 1x10(7) nucleated cells/cm² and 1x10(6) mononuclear cells/cm². RESULTS: It was obtained 2-13x10(7) (median = 2.35x10(7)) nucleated cells/cm² by the method without the Ficoll-Paque gradient density, and 3.7-15.7x10(6) (median = 7.2x10(6)) mononuclear cells/cm² by the method with the Ficoll-Paque gradient density. In all cultures adherent cells were observed 24 hours after being cultured. Cells presented fibroblastoid and epithelioid morphology. In most of the cultures, cell proliferation occurred in the first week, but after the second week only some cultures - derived from the method without the Ficoll-Paque gradient density - maintained the growth rate reaching confluence. Those cultures were submitted to trypsinization with 0.25 percent trypsin/EDTA solution and cultured for two to three months. CONCLUSION: In the samples analyzed, cell separation and mesenchymal stem cell culture techniques from human umbilical cord blood by the method without the Ficoll-Paque density gradient was more efficient than the method with the Ficoll-Paque density gradient.

Comparação entre as células-tronco de sangue de cordão umbilical de neonatos prematuros e nascidos a termo: uma revisão / Comparison between preterm and full-term newborn umbilical cord blood stem cells: a review

As células-tronco são células capazes de gerar diferentes tipos celulares. Entre as fontes de células-tronco encontra-se osangue de cordão umbilical que apresenta um grande número de progenitores hematopoéticos. Essa fonte vem sendo amplamente utilizada em transplantes devido a diversas vantagens, entre elas, a imediata disponibilidade, beneficiando pacientes com doenças hematológicas e imunológicas. Para o sucesso dos transplantes, há a necessidade de se considerar a freqüência das células-tronco nas amostras de sangue de cordão umbilical. Marcadores celulares específicos como a presença da molécula CD34 e a ausência de CD38 indicam o grau de imaturidade das células-tronco hematopoéticas e, conseqüentemente, a sua grande capacidade de proliferação e diferenciação celular. Existem diferenças quanto à freqüência das células-tronco no sangue de cordão umbilical entre neonatos nascidos a termo e prematuros. Essas diferenças podem ser importantes na escolha das amostras armazenadas nos bancos de sangue de cordão umbilical a serem utilizadas nos transplantes de células-tronco. Além disso, as pesquisas com células-tronco têm mostrado grande capacidade de proliferação e diferenciação em vários tecidos. O estudo das células-tronco pode ser a resposta para o tratamento de doenças cardíacas, neurológicas e imunológicas de inúmeros pacientes e, talvez, o primeiro passo para a cura.

Stem cells are cells that have the ability to give rise to different cell types. Among the sources of stem cells, there is the umbilical cord blood, which has a great number of hematopoietc progenitors. This source has been widely used in transplants owingto its advantages like, for example, immediate availability, improving patients with immunological and hematological diseases. In order for the transplant to be successful, it is necessary to consider the stem cell frequency within the samples of the umbilical cord blood. Specific markers like the presence of CD34 molecule and the absence of CD38 indicates the immature level of hematopoietic stemcells and consequently their ability of cellular proliferation and differentiation. There are differences between the cellular frequency in umbilical cord blood from preterm and term newborn. These differences might be important in order for finding a sample stored atumbilical cord blood banks for the transplant. Nevertheless, research using stem cells has attempted that these cells have a great capacity of proliferation and differentiatin into many tissues. Stem cell research offers hope for the treatment of cardiac, neurological and imunological diseases of countless patients and, perhaps, the first step to the cure.

Cord blood transplantation / Transplante de sangue de cordão

The transplantation of progenitor cells has been traditionally performed with bone marrow cells and more recently from peripheral blood. From the 1980s, placental or cord blood became an alternative and there is evidence that this source offers advantages compared to peripheral blood for transplant. Some data related to cord blood and its transplantation, originally presented at the XXWI Congress of Hemotology and Hemotherapy, are related in this report.

O transplante de células progenitoras têm sido realizado habitualmente com células da medula óssea e recentemente do sangue periférico. A partir dos anos 80 o sangue de cordão passou a ser uma alternativa e existem evidências de que o mesmo apresenta vantagens quando comparado ao sangue periférico para o transplante. Neste relato, sinopse da apresentação no XXVII Congresso Brasileiro de Hematologia e Hemoterapia, apresentamos alguns dados em relação ao sangue de cordão e ao transplante.